MDA的研究方法
发布时间：2019-10-25 访问次数：
MDA采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体，氧电极法检测线粒体呼吸控制率（RCR）、磷氧比（P/O），测定呼吸链复合物及α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性.结果:线粒体经MDA作用后，以苹果酸/谷氨酸或琥珀酸作底物，线粒体两条呼吸途径对MDA呈现不同的耐受力，前者在MDA100μmol/L时RCR显著降低（P<0.05），400μmol/L时P/O降低（P<0.05）；后者MDA浓度达到400和800μmol/L时，线粒体P/O及RCR值显著降低（P<0.05）。丙酮酸脱氢酶及α-酮戊二酸脱氢酶分别在50μmol/L和100μmol/L时活性下降（P<0.05），而MDA浓度达到1mmol/L时，苹果酸脱氢酶活性降低（P<0.05）。呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ分别在MDA400和800μmol/L时最大反应速度（Vm）降低（P<0.05），但MDA（0～3.2 mmol/L）对呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ的Vm及米氏常数（Km）没有影响。结论：MDA对线粒体呼吸链及α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶存在不同程度的损伤作用，不同酶对MDA损伤的敏感程度有所差异，本研究中相关酶受MDA损伤的次序可能是：丙酮酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶、呼吸链复合物Ⅰ、呼吸链复合物Ⅱ、苹果酸脱氢酶、呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ.
